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  • [重组人脑利钠肽对心肌梗死后心功能和血流动力学的影响]重组人脑利钠肽

    分类:工作总结结尾 时间:2019-04-17 本文已影响

      脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)是由32个氨基酸残基组成的17环状多肽,BNP通过与其受体结合,从而介导一系列生理学效应。正常成人体内少量BNP主要参与调节体循环和水盐平衡,维持心脏组织微环境稳态,可以明显改善心功能。重组人脑利钠肽(rhBNP),国外商品名为奈西利肽(nesiritide),是以基因重组技术制成的高纯度无菌冻干粉剂,已经被美国FDA批准为急性失代偿性心力衰竭治疗的一线用药,它的另一个治疗应用前景为心肌梗死后的早期治疗。有研究表明rhBNP有利于阻止和逆转心肌梗死后左室重塑[1-3],但对于心肌梗死后持续应用rhBNP的疗效观察少有报道。本研究旨在观察急性心肌梗死(AMI)后持续应用rhBNP对大鼠心功能及血流动力学的影响,为寻求新的治疗方法提供依据。
      1 材料与方法
      1.1 实验材料
      1.1.1 实验药物及仪器 rhBNP组以冻干rhBNP(商品名新活素,0.5 mg/支;西藏诺迪康药业股份有限公司)15 μg/kg静脉滴注。对照组以等体积生理盐水作同期对照。惠普公司5500型超声心动图仪;成都泰盟科技有限公司BL-420F型多导生理记录仪;日本Olympus IX70型光学显微镜;BNP酶联试剂盒购自武汉博士德。
      1.1.2 实验动物及分组 实验选用健康Sprague Dawley大鼠100只,雌雄各半,体质量(300±25)g,广西疾病控制中心动物实验室提供。术后24 h模型制作成功后,随机(随机数字法)分为AMI对照组和BNP治疗组,每组50只;两组再各分为术后48 h、1周、2周、3周和4周各5个亚组,每组10只。
      1.2 实验方法
      1.2.1 大鼠心肌梗死模型制备 参照文献[4],大鼠水合氯醛麻醉,以0号线结扎冠状动脉左前降支根部。开胸时间不超过30 s。应用青霉素腹腔注射预防感染。冠状动脉结扎术后24 h存活且心电图符合心肌梗死改变的大鼠作为心肌梗死模型大鼠。
      1.2.2 心脏超声心动图 分别称取大鼠体质量,腹腔注射麻醉,左胸前部剃毛,采用超声心动图仪检测搏出量占心室舒张末期容积的百分比,即左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)。每个数据均测量3次,取其均值。
      1.2.3 血流动力学检测 采用BL-420F型多导生理记录仪检测。大鼠经腹腔麻醉后,背位固定于鼠台,分离右颈总动脉,插入充满肝素生理盐水的导管,稳定10 min后,记录大鼠心率(heart rate,HR);将导管进一步插入左心室,记录左心室收缩压(left ventricular systolic pressure, LVSP),左心室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure, LVEDP),左心室内压最大上升速率(maximum rate of left ventricular pressure rise,+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(maximum rate of left ventricular pressure fall,-dp/dtmax),观察其血流动力学变化。
      1.2.4 血浆BNP浓度的测定 大鼠股静脉取血4 ml,置于含30 μl 10% EDTA和30 μl抑肽酶塑料管中混匀,40 ℃ 3500 r/min离心15 min,取血浆放入-20 ℃冰箱保存备检。具体过程按试剂盒说明操作。
      1.3 统计学方法
      采用SPSS 11.0统计学软件进行处理。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用成组t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。
      2 结果
      2.1 两组大鼠存活情况
      在实验的4周内,100只大鼠中共7只死亡, AMI对照组3只,rhBNP治疗组4只,逐渐出现呼吸急促、紫绀并死亡,解剖发现明显肺瘀血,考虑死于心力衰竭。最终获得完整资料的大鼠共有93只。
      2.2 两组大鼠不同时间心功能和BNP检测
      结果的比较
      LVEF在两组48 h均较正常下降,以后逐渐上升,其中AMI对照组第4 周较第48小时升高差异具有统计学意义 (P<0.05);BNP治疗组与对照组比较,在第48小时即有明显升高(P<0.05),此后呈上升趋势,但组内各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
      2.3 两组大鼠不同时间血流动力学结果的比较
      AMI后两组HR改善不明显,各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);LVSP在对照组术后1 周起开始升高,与48 h时比较差异具有统计学意义 (P<0.05),BNP组术后48 h与对照组比较LVSP明显升高(P<0.05),以后各时间点之间比较差异无统计学意义(P>0.05);LVEDP在对照组术后4 周与48 h比较有明显下降(P<0.05),BNP组术后48 h 与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),至第4 周时与48 h比较下降更为明显(P<0.05);±dp/dtmax在对照组中呈逐渐增加趋势,至4 周时较48 h明显升高(P<0.05),BNP组治疗后各时间点较对照组均明显升高(P<0.05),但组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。
      3 讨论
      AMI因持续心肌缺血导致心肌细胞的损伤和坏死,心肌结构和心室构型同时产生相应的变化,并使心脏收缩与舒张功能损害、血流动力学发生障碍。主要表现为LVSP和+dp/dtmax下降、左室收缩功能障碍,泵功能减低;LVEDP和-dp/dtmax上升,左室舒张功能减退,室壁顺应性下降,而血流动力学的异常又可导致心肌向心性肥厚,进一步加快心室重构的进展[5-7]。近来的研究表明,AMI后心肌坏死与细胞凋亡共同导致心肌细胞数量减少,且心肌细胞凋亡的持续存在,使心肌细胞进行性丢失,导致室壁变薄,心室扩张,心室重构,最终发展为心力衰竭[8]。

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